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【每周一例】南美白对虾感染肝肠球菌 “慢食”死亡

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【案例525】广东省珠海斗门区横山-南美白对虾养殖池塘(图1),面积6.5亩,水深1.5米,以地下水为水源,盐度2-3,配有6台1.5kW叶轮曝气机。2019年6月26日,39万株“一代苗”被放生。

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进入三伏天后,连续10-15天闷热,7月30日左右,发现水面上漂浮着白色大便。在白粪出现之前,增氧机附近的水比较浑浊,池塘附近的水比较肥,虾大小在100/斤左右。

8月2日下雨,我把一瓶“优肽”和1kg“低聚糖500”混合60-80 kg的材料,连续5天口服。

8月4日,水的浊度降低,逐渐变胖。由于下雨降温,连续三天浮粪少了,但还是有浮粪。

8月5日开始升温,白便再次增多,虾饲料变慢。

8月6日,高温持续,白便持续增多,早晨虾摄食明显减缓。撒网刮虾,10%-20%的虾出现异常症状。目测健康虾的肠胃是饱满的(图2);小病虾空肠不空胃(图3);重病虾空肠空胃,体色呈黄色或淡红色(图4),少数散在尾部有“白肠”,肠内有白色粪便(图5)。解剖发现:健康虾肝胰腺形态完整,与周围组织界限清楚;病虾的肝脏和胰腺呈白色,不成形,呈“水样”。

从池塘中采集虾样44个,其中健康13个,轻度患病13个,重度患病18个。从虾的肝胰腺、肠和胃中分离细菌,划线接种于胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA培养基)中,室温培养24h几个小时。鳃、肌肉、肝胰腺组织用95%酒精固定,送实验室进行PCR检测。肝、胰、肠用伯恩氏液固定,进行组织病理学观察。

结果显示,培养24小时后,接种胃肠组织的培养基中生长出大量优势菌落,接种肝胰腺组织的培养基中几乎没有菌落生长(图6)。健康虾样组EHP检出率为30%,轻度虾样组为69%,重度虾样组为94%。白斑综合症病毒(WSSV)、传染性皮下和造血组织坏死病毒(IHHNV)和虾血细胞虹彩病毒(SHIV)均为阴性。观察虾从健康到重病的组织病理学变化如下:肝胰腺组织从正常或轻度萎缩到重度;腺管解体和腺管间细胞增殖的数量由少到多。在肝胰腺组织中观察到的肝肠球菌数量从零星到大量不等(图7)。肠道组织无明显变化,部分轻度增生,部分上皮增生,部分虾有疑似脱落肝胰腺的肝肠细胞(图8)。在大多数对虾的肌肉、肝脏和心脏中都可以看到大小不一的气泡。

8月16日,连续几天都是高温天气。虾吃的慢,死虾增多,但白粪现象没有明显增多。池塘主人担心继续繁殖死亡人数会更大,所以提前卖虾。

分析:1。根据外观症状,将对虾分为三组,即健康组、轻度患病组和重度患病组。普通PCR检测肝肠球菌的检出率与健康状况密切相关。组织病理学检查表明,肝胰腺内肠球菌数量的变化也与疾病的严重程度密切相关,表明肠球菌感染与虾的发病有关,感染率或感染强度越高,病情越严重。

2.本次调查的虾的组织病理学特征与以往的调查不同(见[案例218-220]),没有明显的

3.无论是本病例的细菌分离培养结果还是以往的研究结果都表明,斑节对虾肝胰腺中分离培养的细菌很少,胃肠道组织中的细菌没有明显的规律性,细菌在本病例中的作用尚不清楚。(研究所一室齐刘技术部唐少林王张继鹏2019年10月31日)

今年市场普遍反映白大便严重,导致大量无法饲养的情况。一开始我们是以调查白大便为目的去调查的。药房也认为池塘出现白粪,实际效果不大的虾,水面出现白粪,并不是之前调查的白粪的典型病理特征,而是通过实验室检测和病理观察发现肝肠球菌造成的危害。

由于本次调查彻底颠覆了我们对肝肠球菌危害的认识,将连续出现三个与调查相关的案例,亮点各异,揭示其目前在对虾养殖中的危害,对我们了解土池“白粪”高发和养殖不成功的原因,以及今后如何健康养虾具有参考价值。

组织病理学观察显示,“大部分对虾肌肉、肝脏、心脏等组织均可见到大小不一的气泡”。泡病(形态结构发生了变化,可称为病)已成为对虾养殖的常态,严重程度和发生频率不同,对具体病例的危害程度也不同。很难确定它在这种情况下起什么作用,这可能会加重对虾的肝肠细胞虫病(虚弱、衰弱、皱缩、失明、

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