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人类培育的第一只不育动物是为了学习动物的生物学特性

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本文的内容

1.原生动物的生物学特性。2.无菌动物的应用。3.小鼠肝炎病毒的传播途径。4.狗和猴子有无菌实验动物吗?

悉生动物的生物学特性

大多数关于原生动物的研究都是无菌生物。细菌、藻类和原生动物的单一纯培养物是无菌生物。还开展了培育不育高等植物和各种多细胞动物的研究,并取得了成果。不育脊椎动物在后生动物的研究中起着重要作用。1899年,肖特利乌斯培育出不育鸡,但它们只活了17天。失败是由于饲料营养不足。1912年,经过反复改进饲料,科恩迪终于成功培育出不育鸡;1932年,格列姆斯泰特成功培育出不育豚鼠。随着无菌操作和饲养技术的提高,在20世纪40年代,成功培育出不育的猴、鼠、兔、鼠、狗。60年代获得不育猪、羊、牛;1971年,不育马繁殖成功。无菌动物的饲养环境必须绝对没有可能感染动物的微生物和其他有机体。根据这一要求,美国Rainiser于1943年用金属材料制成了一种能承受高压蒸汽灭菌的隔离器。隔离器有一个玻璃观察窗和操作橡胶手套。他用这个隔离器饲养无菌鸡。1946年,日本宫川在隔离器上增加了遥控精密机械手。1959年,无菌隔离器的主要部分由Trexler的无毒塑料薄膜制成。这种隔离器制作工艺简单,易于观察和操作,成本只有金属的十分之几,灭菌简单。输入无菌隔离器的空气要经过0.3微米过滤率99.97%以上的高效过滤器,排气口也装有高效过滤器,防止空气回流时带入细菌。饲料、饮用水、被褥必须经过真空高压或钴60辐照灭菌后输入容器。培育无菌产蛋动物,如家禽,需要从微生物感染最少的健康动物中挑选不被粪便污染的精制蛋,对蛋的表面进行彻底消毒,送入无菌隔离器进行孵化和育雏。培养胎生动物,如哺乳动物,应通过无菌剖腹产将成熟的胎儿从无菌子宫中取出,然后通过消毒液浸泡罐放入无菌隔离器中,用人工配制的初乳喂养。人工乳的营养成分和饲养技术是无菌动物饲养成功的关键。断奶后喂消毒饲料和饮水。应定期检查无菌动物,以确保无菌。一般两周检查一次,污染马上消除。无菌脊椎动物虽然不携带各种细菌,但不排除有少数微生物可以通过母体胎盘垂直感染胎儿,如病毒、弓形虫等。因为没有微生物的刺激,生命体的淋巴系统不发达,体液和细胞防御系统都不如正常动物。浆细胞少,脾脏小,白细胞少,吞噬能力差,血清中杀菌活性差,球蛋白含量低,抗菌凝集素少,所以不育动物容易感染疾病。但不育动物在抗原刺激下,可以产生和正常动物一样的免疫效果。不育动物从未接触过微生物。当使用特异性感染因子——致病菌时,总能获得相同的敏感性,并产生一种纯的特异性抗血清,有助于传染病病原学的研究。实验动物(老鼠、狗等)的繁殖和饲养。)和家禽家畜,为了控制传染性疾病,可以用一种或多种非病原性细菌饲养的不育动物或不育动物(原虫)作为建群的种子动物。无菌动物体内的抗原很少,是由它们提供的。无菌器官、组织和细胞是研究天然免疫或免疫机制的良好模型。将从动物体内分离的一种或多种真菌、细菌和病毒接种到不育动物体内,可以探索它们与宿主之间的共生、寄生、拮抗和变异,开展生理、生化、细胞学、胚胎学、病理学、临床治疗、肿瘤、免疫、代谢和营养等方面的研究。T

医学研究需要无病毒无抗原的动物模型,培育出芽猿;畜牧业要发展牛、马、羊、猪,消灭各种病原体;原植物已用于生物固氮因子的重组,促进更多的作物携带固氮苗,研究苗根及根际微生物、农药、杀虫剂的无害化。营养生物也被用于微生态学的研究,以防治人、畜、植物的生态疾病,达到健康、长寿、增产的目的。

00-1010无菌动物是指在无菌无特定病原体的条件下,剖腹取出胎儿,在无菌隔离室内饲养,饲料和饮水均经过消毒,定期检查证明动物体内外无微生物和寄生虫(包括大部分病毒)的动物。

& quot细菌& quot不育动物主要指细菌,但严格地说,它还包括微生物如真菌、立克次体、支原体和病毒,以及各种寄生虫。所谓的& quot没什么& quot不是绝对的,但是已知的微生物和寄生虫按照现有的科学知识和检验方法是无法在一定时间内检测出来的。

随着科学技术的发展,现在被认为是不育的动物将来可能代替不育的动物来检测微生物和寄生虫,因为这& quot没什么& quot是相对的。

到目前为止,无菌动物的微生物检验方法还没有建立起来,所以研究人员有各种各样的检验方法,其中在病毒和立克次体的检验方面还存在相当多的问题。在不育动物中,实验室使用最多的不育小鼠,通过电镜证明胸腺细胞中仍有白血病病毒的病例。

所以现在所谓的不育动物,是指动物体内外细菌、真菌、原虫、内外寄生虫检测失败的动物。

00-1010在饲养动物的环境中和动物的体表、粘膜和消化道内容物中,存在多种微生物和寄生虫。如何控制微生物尤为重要。一个优良菌株的生产组或实验组并不少见。模型动物& quot因感染病原微生物或寄生虫而被彻底破坏,实验将失败。目前,通过微生物监测手段,根据微生物控制的净化程度,将实验动物分为无菌动物、原虫动物、有特殊病原体的动物和清洁动物四类。

/>1.无菌动物(Germ free animals)是指机体内外均无任何寄生物(微生物和寄生虫)的动物。此种动物在自然界中并不存在,必须用人为的方法培育出来。其法:一般将临产前的健康动物用麻醉药品或颈椎臼法处死后,立即浸泡在37℃灭菌液中,送进无菌室(或无菌隔离器),按无菌手术进行剖腹,切除带胎子宫(子宫内首先应无菌),将其浸入消毒液里并输送到另一隔离器中,切开子宫取胎,经用灭菌纱布揩拭仔体并断脐(电刀切断)后,放隔离器内人工喂乳或用其它品系的无菌母鼠作保姆供养。象小鼠和大鼠等用人工喂乳非常麻烦,故采用保姆代养较为方便。而象豚鼠因在一定程度上能自力饮乳,故人工哺乳较容易。另外,象禽类、鱼类、昆虫类,因是在卵中无菌的前提下进行的,故用药物将卵周围灭菌后移入无菌隔离器内使其孵化即可,而且,这些动物一般在在出生后能自力采食,故较易育成。
2.悉生动物(Cnotobiotes animals)是指机体内带着已知微生物(动物或植物)的动物。此种动物原是无菌动物,系人为的将指定微生物丛投给其体内,例如使大肠杆菌定居在无菌小鼠体内,在进行微生物检查时,仅能检出大肠杆菌。亦有人工投给二种以上的已知微生物。悉生动物一般分为单菌(Monoxenie)、双菌(Dixenie)、三菌(Trixenie),或多菌(Polyxenie)动物。此种动物同无菌动物一样是放在隔离器内饲育的,但因其带有已知的微生物,故隔离器内有微生物及其代谢产物的污染。例如,人工投给的微生物,除可在饮水中增殖外,还能在隔离器内放出大量的氨气。
3.无特定病原体动物(Specefic pathogen-free animals)是指机体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物,简称SPF动物。但非特定的微生物和寄生虫是允许存在的,故其实际上就是指无传染病的健康动物。由于用疫苗和药物进行预防及治疗,或用淘汰带菌动物来作出SPF动物的方法并不实用(既浪费时间,又难保确实除去病原)。故一般大多先培育出无菌动物或悉生动物后,再把其转移到有封闭系统(Barrier System)的设施中饲育繁殖。原则上SPF动物室内是不允许存在病原菌的,但在封闭系统环境中,难免有很多非病原性微生物会逐渐进入动物机体内,故亦有人把这个转移过程称之为通常动物化。SPF动物的祖先是无菌动物,按理来说,无菌动物的子宫内和卵中应该是无菌的,然而,有些病毒实际上是通过亲代传给胎儿的,因此,在作出无菌动物和SPF动物之前,必须充分考虑这个问题。
4.清洁普通动物(Clean conventional animal,CCV)(亦称最低限度疾病动物MOA)或称清洁动物(Clean animal,CL)
来自屏障系统的SPF动物,饲养在设有两条走廊的,温湿度恒定的普通设施中的动物。垫料、饲料、用具等均应经过高压消毒。饮水pH为2.5~2.8,鼠盒上带过滤帽,空气亦应经过一定的过滤,工作人员穿干净服装操作,此类动物的微生物控制标准基本与SPF相同,不同之处为血清病毒抗体检查(脑脊髓炎病毒、鼠肝炎病毒……)经常可检出一定滴度的抗体,但不允许出现临床症状和脏器的病理变化和自然死亡。
普通动物(Conventioal animals)是未经积极的微生物学控制,普遍地饲养在开放卫生环境里的动物。垫料和食物不经高压消毒,饮水为自来水,不喂青饲料。鼠应排除肺炎病毒,沙门氏菌和链球菌,地鼠不应有蛲虫。普遍动物只能供教养和一般性实验,不适用于研究实验。
鲜切蔬菜褐变及微生物的控制
一、褐变的控制:
在鲜切蔬菜加工中,热处理会对组织产生伤害,从而加速产品的败坏。而采用亚硫酸盐处理,又会造成二氧化硫的残留,对人体产生一些不良的影响。因此,在鲜切蔬菜加工中,必须采用其他的方法来抑制酶褐变的发生。
1.化学方法。有望取代亚硫酸盐抑制酶褐变的化学药剂,主要有柠檬酸、抗坏血酸、半胱氨酸、4-已基间苯二酚等。如对去皮切片马铃薯,用0.5%半胱氨酸加2%柠檬酸浸泡3分钟,可爱效控制褐变的发生。采用PH值为5.5的抗坏血酸钠、半胱氨酸及乙二胺四乙酸(EDTA)混合液处理,可有效控制蘑菇的褐变。鲜切茎用莴苣圆片,用1%-5%醋酸溶液或用醋酸含量为6%的食醋处理,都可有效地抑制产品在冷藏和流通期间褐变的发生。
一般防褐变的化学处理,都要包装前进行,并且以几种药剂混合浸渍处理的效果比较好。用防褐变药剂结合可食性涂膜处理,则能取得更好的效果,如鲜蘑菇切片用含1%抗坏血酸和0.2%EDTA的可食膜处理,比单独使用化学防褐变剂或可食性膜包装,都能更有效控制酶褐变的发生。
2.物理方法。鲜切蔬菜采用低氧和高二氧化碳气调包装,可有效控制产品贮藏期间酶褐变的发生。一般适宜的氧气浓度为2%-10%,二氧化碳浓度为10%-20%。如切片马铃薯用20%的二氧化碳加80%的氮气进行气调包装,可有效地控制贮藏期间褐变的发生。
3.酶法。这种方法,是利用蛋白酶对多酚氧化酶的水解作用,从而抑制其活性和酶褐变的发生。目前已分别从无花果、番木瓜和菠萝占提取得到三种蛋白酶,即ficin、papain和bromelain,它们都能有效控制酶褐变的发生。如用ficin抑制马铃薯的褐变,其作用与亚硫酸盐相当。因为菠萝中含有蛋白酶,故使用菠萝汁处理鲜切苹果片,也可有效抑制产品的褐变。
二、微生物生长的控制:
生产上控制微生物的生长的方法主要有以下几种:
1.创造低温条件。造成低温环境,可有效抑制微生物的生长,从而达到保持品质,延长货架期的目的。因此,在鲜切蔬菜的加工、贮存和流通过程中,应尽可能创造适宜的低温条件,一般为0-5℃。
2.使用化学防腐剂。醋酸、苯甲酸、山梨酸及其盐类,可有铲地抑制微生物的生长繁殖。这对那些在低温下仍能生长的腐败菌和致病菌,是一个很有效的控制措施。
3.实行气调包装:采用适当的低氧和高二氧化碳气调包装,能抑制好气性微生物的生长。但是,必须注意避免缺氧环境,防止厌氧微生物的生长和产品本身的无氧酵解而产生异鼓掌。
4.降低PH值。鲜切蔬菜组织的PH值一般为4.5-7.0,正适合于各种腐败菌和致病菌的生长。在鲜切蔬菜中加入适当的醋酸、柠檬酸和乳酸等,可降低蔬菜组织的PH值,抑制微生物的生长繁殖。但一定要掌握好用量。否则,过多的酸会破坏新鲜蔬菜本身的风味。
5.应用生物防腐剂。生物防腐剂,是指来自植物、动物及微生物中的一类抗菌物质。由于鲜发蔬菜为即食产品,化学防腐剂的应用受到一定限制,因此来自生物的天然防腐剂的研究和应用,便日益受到重视。现已发现,乳酸菌的代谢物细菌素或类细菌素,能有效地抑制鲜切蔬菜中嗜水气单胞菌和单核李氏杆菌等有害微生物的生长。
在孵化生产过程中加强对病原微生物的控制
各种病原微生物遇到适宜的环境条件就会迅速而大量地繁殖, 孵化场适宜的孵化温度和湿度为微生物的繁殖提供了良好的条件, 而病原微生物一旦感染了胚胎或雏鸡,就会造成胚胎的早期死亡及雏鸡产品质量的低劣, 轻者造成经济效益的下降,重者威胁孵化场的生存。 可见加强孵化生产过程中的病原微生物控制,已成为孵化场管理工作中最重要的内容。
一、严格控制病原微生物的来源
1.种蛋种蛋要求来自无疫情的健康鸡群所提供, 但在种蛋产出过程中仍有可能被病原微生物污染,除了要求种蛋在种鸡场经过消毒外, 运至孵化场后必须以3倍量的甲醛、高锰酸钾熏蒸消毒1次,经化验总菌数小于20个, 其中主要致病菌,如大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌含量为0,方可放入蛋库贮存。种蛋入孵后,每周对种蛋进行1倍量的甲醛、高锰酸钾熏蒸消毒,以控制细菌的生长。
2.人体人体是病原微生物的主要载体之一, 要求外来人员一律拒绝进入孵化场生产区,本场工人每天入车间要求消毒、淋浴,更换清洗消毒后的工作服、帽子、口罩、拖鞋,出车间也要求淋浴。车间的脏、净区不能串岗, 特殊情况由脏区到洁净区需要淋浴更衣。在接触种蛋、雏鸡前,要先洗手消毒才能操作,无论工作或休息时,严禁对种蛋、雏鸡咳嗽、打喷嚏、吐痰, 以减免细菌的传
播。
3.车辆严禁外来车辆进入场区,本场运蛋车入场要求喷洒消毒, 司机下车通过消毒通道方可进入场区,在卸种蛋过程中,司机不许下车。 运蛋车不准许运输除种蛋之外的其他物品,车厢要求每周至少熏蒸消毒1次。
4.用具孵化场所有用具,如蛋筐、蛋盘、拖布、扫帚等物品, 一经外界进入场区都要消毒后方可使用,以控制由于用具不洁造成病原微生物的传播。
5.包装材料孵化场所用的主要包装材料为雏鸡盒,入场区后要先放入距生产区50米远的库房中先进行薰蒸消毒后才可使用, 严禁任何未经消毒的包装物品进入生产区域。
6.空气空气携带病原微生物更有其随意性, 所检测的大部分病原微生物都是由空气带入的,由于蛋库、孵化厅特定的环境要求有大量的空气流通, 此环节的控制往往成为难点。在管理中,要求对进气孔、过滤网每周不少于3次的卫生清理,尤其对孵化、出雏器的进、出风口要时常保持清洁, 以防细菌循环传播。
二、控制病原微生物的繁殖
由于孵化场特定的温室、湿度等条件, 为细菌繁殖提供了较理想的场所,这就要求管理者从孵化过程的各个环节入手,及时检测细菌的生存状态, 采取各种有效措施切断病原微生物的传播渠道。除了以上所述, 从种蛋入场区严格控制开始,还要注意保持孵化器的清洁卫生,每周不少于2次进行彻底擦拭,尤其进、出风口处,不允许有灰尘。孵化、出雏厅的四周墙壁、地面, 每周不少于3次彻底用消毒液清理,要求所检测的细菌总数不超过32个。出雏后要认真冲洗出雏器,不允许留有异物,消毒要完全彻底,出雏盘要冲洗干净,消毒彻底,以防病原微生物污染下批鸡雏。每次出雏后,要对出雏场地进行彻底清洗、 消毒。由于孵化生产过程有其循环性,因此,要求鸡蛋、入孵、冲洗、 出雏任何一个环节的卫生消毒工作都要做得全面、彻底, 才能从整体上切断病原微生物的传播途径,降低其生存数量,最终达到提高雏鸡质量、增加经济效益的目的。
其他信息参考
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犬和猴有没有无菌级实验动物

犬和猴有无菌级实验动物
随着生物学的进步和技术的发展,试行了各种动物的无菌化,而无菌动物因为具有独特的优越性使其成为一种新型的实验动物。现在无菌动物的品种已经很多,不仅小鼠、大鼠、豚鼠和家兔等小动物已有无菌动物,而且狗、猫、猴、猪、山羊、绵羊和牛等大动物以及鸡、火鸡、醇鹑、青蛙、蛇,甚至蚕、苍蝇、白蚁等也都有了无菌动(生)物。这些都是为了适应科学发展的需要而培育的,其中的小鼠、大鼠、豚鼠等在国外一些发达国家已能大量生产,并比较方便地应用于日常研究中了。

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